流体剪切力实验

1.哪些特定应用使用μ-Slide Ⅵ 0.1？

如果实验中的细胞数量有限(例如当使用原代小鼠细胞时)，或者使用最少量的试剂做进行免疫荧光，建议使用µ-Slide VI 0.1 。对于灌注实验，µ-Slide VI 0.1 会产生最高水平的剪切应力。

2.μ-Slide y 形是湍流中的流形？

不是，当使用标准流速和水性介质时，在小通道中无法真正实现湍流特性。无量纲雷诺数(Re)用于表征不同的流型。层流发生在低雷诺数，而湍流发生在高雷诺数。表明管道和生物容器中层流的临界雷诺数是Re=2000。雷诺数超过Re 4000，最有可能代表湍流。即使在 µ-Slide y-shaped中流速非常高（60毫升/分钟），雷诺数仍非常低，约为Re=200，表明层流。

3.ibidi泵系统是否可以使用除ibidi μ-Slides 以外的任何载玻片？

尽管 ibidi 泵系统经过设计和优化以与 ibidi µ-Slides 一起使用 ，但任何通道都可用于研究细胞上的剪切应力，只要它可以连接到 Perfusion Set。我们建议在自定义流量室上使用标准母 Luer 适配器。 请记住，泵仅提供 -95 mbar 和 +95 mbar 之间的气压。这意味着流阻不能太高。此外， 当使用 ibidi 通道载玻片以外的任何载玻片时， PumpControl 软件将无法根据给定的气压计算剪切应力。

4.多大的剪切应力适用于滚动和粘附分析？

在滚动和粘附分析中，应该使用与内皮细胞层的标准流动调节相同的参数。有两件事需要考虑: 首先，在进行滚动和粘附实验之前，内皮细胞层应该进行几天的流动调节。这个阶段的剪切应力可能不同于在滚动和粘附期间施加的剪切应力。其次，在粘附试验中，灌注培养基的速度也起作用。可能需要改变剪切应力。此外，有必要测试最佳流速/剪切应力。

5.为什么我的细胞在流动条件下没有拉长？

内皮细胞的生理形状在不同类型的血管中差异很大。并非所有类型的内皮细胞在其生理环境中都被拉长。例如，HUVEC在血流的第一阶段伸长。为了覆盖整个表面，细胞通过在流动方向上伸长来增加它们的表面。在此流动期之后，细胞层生长成定向鹅卵石图案，不再显示显著的伸长。

6.在进行分析之前，应该对细胞层施加多长时间的剪切应力？

细胞对机械剪切应力的适应性反应可长达数天。因此，根据您正在研究的标记，可能有必要在分析前对细胞层进行长达几天的调节。我们建议在长期实验中测试感兴趣的参数，以确定最佳的测量时间点。

7.是否可以使用ibidi泵系统进行滚动和粘附分析？

是的，ibidi 泵系统适用于滚动和粘附分析，包括出色的成像。悬浮细胞可以通过将它们添加到培养基储器或通过额外的 注射口注射而引入循环培养基中。请记住，包括悬浮细胞在内的培养基在细胞层上循环。与蠕动泵相比，使用 ibidi 泵系统时悬浮细胞的非特异性激活非常低。

8.应该对内皮细胞施加多大的剪切力？
 

生理剪切应力取决于感兴趣的组织和血管类型。根据文献，人体内的生理剪切应力值在0至60dyn/cm²之间变化。在开始实验之前，确定适用于所用细胞类型的相关剪切应力范围至关重要。有关剪切应力对细胞影响的更多信息，请点击查看。

9.如何增加流动分析中的细胞数量？

将通道载玻片串联到一个灌流装置/流体单元中，可以轻松地增加流式检测中细胞的数量。查看载玻片串联方法，提供了连接多个通道载玻片到一个流体单元的详细方案。此外，将细胞播种到通道底部和顶部，也可以增加通道中的细胞数量。

10.在开始流动之前，细胞应该附着多久？

在流动开始之前，细胞必须紧密附着在通道载玻片底部。附着时间取决于细胞类型、培养基添加物和表面。例如，在胶原涂层表面上使用HUVEC时，附着时间只需半小时。之后，就可以施加剪切应力。为了使细胞有机会适应新的环境条件，建议逐步增加剪切应力。关于HUVEC的详细信息请参阅应用说明书（可点击查看）