ibidi 3D 细胞培养微插件(Micro-Insert 3D, ibidi 80496 或 80499)是一种生物相容性硅胶插件,其可在基质胶表面上或基质胶内部创建细胞界面的同时,实现细胞界面与基底侧、顶端侧的流体接触;其独特的无膜设计更为镜检细胞提供了诸多便利。除此之外,ibidi 3D 细胞培养微插件在 ibidi μ-Dish 35 mm 高壁培养皿中即插即用,操作简便,大大提升了实验的便捷性和实用性。
该款插件的应用广泛,包括共培养、转运研究、顶端-基底细胞极性测定以及其他基于水基基质胶的细胞实验。
图 1:ibidi 3D 细胞培养微插件(Micro-Insert 3D, ibidi 80496 或 80499)。
图 2:图 2:ibidi 3D 细胞培养微插件的应用情景。
ibidi 3D 细胞培养微插件凭借其产品的多样化灵活应用,为用户提供了一系列技术检测的可能性。该插件可在水基基质胶上方构建一层细胞层,该细胞层构成了细胞界面,将培养腔室分隔为基底侧和顶端侧两个区域。此外,用户还可以轻松实现多种改良措施,例如在水基基质胶中嵌入细胞或细胞球状体/类器官。另外,细胞亦可在微插件的外孔中进行培养,这一设计增强了共培养实验的灵活性。
图 3:在 ibidi 3D 细胞培养微插件中接种细胞的多种方法。
产品优势
ibidi 3D 细胞培养微插件可用于通常需要使用多孔膜插件的应用场景。它采用水基基质胶而非多孔膜来将培养皿分隔成上下两个区域。这种无膜设计使得在相差显微镜和荧光显微镜下能够更好地进行观察,非常适合长期、高分辨率的活细胞成像。与多孔膜相比,ibidi 3D 细胞培养微插件为细胞培养提供了更贴近体内的模型——无硬表面或人工孔,亦无刚性的细胞界面。除此之外,其可在基质胶表面上或基质胶内部创建细胞界面的同时,实现细胞界面与基底侧、顶端侧的流体接触。
图 4:在 ibidi 3D 细胞培养微插件中填充基质胶及接种细胞。
ibidi 3D 细胞培养微插件的底部具有粘性,可以防止在光滑、干燥的表面(如显微镜载玻片和培养皿)上发生泄漏。实验者只需使用无菌镊子即可轻松地将 ibidi 3D 细胞培养微插件转移到任何实验器皿中使用。
图 5:ibidi 3D 细胞培养微插件相对于传统带膜插件的优势一览。
应用示例
1)免疫荧光染色
如图 6 所示,对接种于 ibidi 3D 细胞培养微插件内、大鼠尾源胶原蛋白 I 基质胶表面的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)进行宽场荧光镜检。细胞在接种 48 h 后固定。F-肌动蛋白细胞骨架用 Alexa Fluor 488-鬼笔环肽(绿色)染色,细胞核用 DAPI(蓝色)染色;图像是在尼康显微镜下使用 20× 物镜拍摄的。
图 6
如图 7 所示,对接种于 ibidi 3D 细胞培养微插件内、大鼠尾源胶原蛋白 I 基质胶表面的大鼠成纤维细胞(Rat1)进行宽场荧光镜检。细胞在接种 24 h 后固定。F-肌动蛋白细胞骨架用 Alexa Fluor 488-鬼笔环肽(绿色)染色,细胞核用 DAPI(蓝色)染色;图像是在尼康显微镜下使用 10× 物镜拍摄的。
图 7
如图 8 所示,对接种于 ibidi 3D 细胞培养微插件内、包埋于大鼠尾源胶原蛋白 I 基质胶中的人纤维肉瘤细胞(HT-1080)进行宽场荧光镜检。细胞在接种 72 h 后固定。F-肌动蛋白细胞骨架用 Alexa Fluor 488-鬼笔环肽(绿色)染色,细胞核用 DAPI(蓝色)染色;图像是在尼康显微镜下使用 10× 物镜拍摄的。
图 8
2)活细胞成像
如图 9 所示,对接种于 ibidi 3D 细胞培养微插件内、大鼠尾源胶原蛋白 I 基质胶表面的小鼠成纤维细胞(NIH3T3)进行相差镜检。该图像是在 EVOS 显微镜下,使用 4× 物镜,于接种 24 h 后拍摄的。
图 9