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    实验室仪器 / 设备、耗材、细胞库 / 细胞培养、试剂

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使用 ibidi 双腔室载玻片进行细胞共培养实验

779 人阅读发布时间:2024-06-07 17:40

  • 拆开包装,将其放在载玻片架或其他合适的表面上。制备受体细胞,并在中心小孔中接种 40 μL~60 μL 细胞悬液。所需细胞密度因细胞种类而异,建议使用的细胞密度范围是 510×104cells/mL;5\sim10×10^4\,cells/mL;

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  • 制备饲养细胞,并在每个外周小孔中接种 40-60 μL 细胞悬液。当使用经 ibiTreat 处理的培养表面时,细胞悬液可能在外周 8 个小孔之间发生少许混合。不要用培养基润湿内孔间的隔垄,小心操作,不要在细胞贴壁前混合培养基;

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  • 细胞贴壁后,排空 9 个小孔,以防止细胞混合。用 40~60 μL 培养基洗涤 9 个小孔,以去除未贴壁细胞(未显示)。然后,向每个腔室(大孔)中注入400~600 μL 培养基,使两种类型的细胞通过上清液连通。

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其他细胞共培养实验方案

1)用共培养载玻片培养细胞球状体

µ-Slide 双腔室共培养载玻片支持在外周小孔中接种饲养细胞的同时,在基质胶内培养细胞球状体。如下图所示,内皮细胞之类的多细胞球体被嵌入到胶原凝胶中培养。该细胞球状体在中心小孔内生长,与释放可溶性因子的癌细胞共同培养。I 型胶原基质胶之类的亲水性 3D 基质胶不会阻碍分子的扩散。

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2)用 2 孔细胞划痕插件进行 2D 细胞共培养

ibidi 细胞划痕插件可用于在单一培养皿中并列培养不同类型的细胞。它作为一个细胞生长的模板,仅允许在指定区域内接种细胞。移除细胞划痕插件后,不同类型的细胞将无阻碍地直接相邻生长。与共培养载玻片相比,该法能够创建独立的细胞区块;根据所使用的培养皿或多孔板,实验者还可以单独选择细胞数量和培养基体积。

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3)细胞在 3D 基质胶中的共培养

ibidi 四孔细胞划痕插件提供了可接种细胞的小孔(细胞嵌入到 3D 基质胶中)。通过这种方式,不同类型的悬浮细胞或贴壁细胞可以单独培养,并共享同一上清液。实验者可根据需要收集或更换此上清液,而无需将细胞从基质胶中洗脱。

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