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优化相差显微镜成像解决方案
354 人阅读发布时间：2023-08-14 09:35
相差成像
到目前为止，相衬是生物光学显微镜中最常用的方法。它是细胞培养和活细胞成像中成熟的显微技术。当使用这种廉价的技术时，无需预先固定或标记，就可以在自然状态下观察活细胞。
未染色的活细胞几乎不吸收光。光吸收不良导致图像中强度分布的差异极小。这使得细胞在明场显微镜下几乎不可见或根本不可见。当光穿过细胞时，会发生小的相移，这是人眼看不到的。在相差显微镜中，这些相移被转换成振幅的变化，可以观察到图像对比度的差异。然而，这种无标记技术在很大程度上取决于光路中组件的正确对齐。这种对准可能会受到自然发生的弯液面效应的干扰，从而导致相衬变弱。
相差显微镜要考虑的一个重要问题是弯液面，它是在气液界面自然形成的。这种现象会显着降低图像质量，尤其是在像标准 96 孔板这样的小型培养孔中。由于弯液面而产生的衍射扰乱了光路内相位环和相位板的正确对准。
相差显微镜要考虑的一个重要问题是弯液面，它是在气液界面自然形成的。这种现象会显着降低图像质量，尤其是在像标准 96 孔板这样的小型培养孔中。由于弯液面而产生的衍射扰乱了光路内相位环和相位板的正确对准。
左边具有弯液面的光束路径未对准，右边是无弯液面的光路对准正确，相位对比良好
ibidi 开发了多种解决方案来克服这个问题——并保证出色的相位对比图像：
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ibidi µ-Slide 15 孔 3D 和 µ-Plate 96 孔 3D
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ibidi 通道 µ-Slides
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ibidi µ-Slides Ph+
ibidi µ-Slide 15 孔 3D 和 µ-Plate 96 孔 3D
µ -Slide 15 Well 3D 和µ-Plate 96 Well 3D 提供理想的细胞培养容器，可获得出色的相差图像。一种几何技巧，即“孔中孔”技术，抑制了弯液面的形成，并在整个观察区域产生了良好的相位对比。
1.气液界面弯液面：大部分观察区域相差较差。 2.凝胶表面的弯月面：不可能同时聚焦所有细胞。
ibidi 通道 µ-Slides
ibidi通道 μ-Slides为相差显微镜提供了理想的光学条件。培养细胞时，通道自下而上充满培养基。这在几何上抑制了弯液面的形成，并在整个通道中实现了出色的相差。
ibidi µ-Slides Ph+
ibidi µ-Slides Ph+专为相差显微镜设计。每个孔中的特殊中间板可避免弯液面形成并保证出色的相差——无论孔的哪个部分都完美成像。
