活细胞成像

活细胞成像是活细胞动态过程的延时显微镜观察。它能够观察细胞与细胞的相互作用、单细胞的行为以及细胞器或细胞分子的动态。可以应用多种成像技术，例如相差显微镜、荧光和共焦显微镜、多光子显微镜、光片显微镜，甚至 TIRF 和超分辨率显微镜。

细胞生物学中的许多主题可以使用活细胞成像来解决：

• 例如，在趋化性测定或伤口愈合测定中研究细胞迁移

• 使用流动细胞培养模拟血液或淋巴管

• 通过管形成实验研究血管生成

• 测量细胞随时间的增殖情况

• 使用特定荧光染色和高分辨率显微镜分析细胞间和细胞内信号传导

• 深入了解细胞骨架动力学

高分辨率活细胞成像，用于可视化心肌细胞的收缩率，在35 mm ibiTreat高壁培养皿（涂有纤连蛋白）中。F-肌动蛋白用 LifeAct 染色。100 倍物镜。

在整个活细胞成像实验过程中，细胞需要保持活力和健康。因此，必须在显微镜上建立和维持生理条件。对于研究人员和设备来说，这都带来了一些挑战，并且需要精确的实验规划。然而，活细胞显微镜为更好地了解细胞内的生物动力学提供了许多新的可能性。

活细胞成像参数-显微镜下的生理状况

细胞对其环境的变化做出敏感的反应。温度、湿度和CO 2 /O 2水平等因素显着影响细胞培养测定的结果。为了获得生物学相关且可重复的结果，在活细胞成像实验期间保持显微镜台上的最佳条件至关重要。

为了在生理条件下实现高质量的活细胞成像，需要考虑以下参数：

环境：

• 温度

• 介质的二氧化碳 (CO 2 ) 水平和 pH 值

• 湿度和蒸发

• 氧气 (O 2 ) 水平

光学方面：

• 凝结

• 成像方法和光子剂量

ibidi解决方案

ibidi 镜载活细胞孵育系统可用于载玻片/培养皿和多孔板。它们可以在任何倒置显微镜上进行短期和长期分析期间准确可靠地控制重要的活细胞成像参数（温度、CO 2和 O 2浓度以及相对湿度）

实验实例：

B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞在ibidi35 毫米高壁玻璃底皿的层粘连蛋白涂层表面上迁移的时间推移。

使用 Olympus X-81 显微镜上的 100 倍浸入式物镜，在ibidi Stage 顶部孵化器载玻片/培养皿、CO 2 – Silver Line中历时 10 分钟获取相差显微镜图像。

数据由德国汉诺威医学院的 Jonas Scholz 和 Jan Faix 教授提供。


延时 TIRF 成像显示突变型 NIH-3T3 小鼠胚胎成纤维细胞的粘着斑动力学，该细胞在ibidi35 mm 高壁玻璃底皿中转染了 EGFP-Paxillin 。

TIRF 显微镜图像是在 ibidi Stage Top 孵化器载玻片/培养皿、CO 2 – Silver Line 中使用 Nikon Eclipse 显微镜上的 TIRF 100x 浸没物镜在 12 小时内获得的。

数据由德国汉诺威医学院的 Jonas Scholz 和 Jan Faix 教授提供。