细胞计数中最常见的 10 大错误

前言

部分研究人员仍倾向于采用血细胞计数板进行人工细胞计数，尽管此方法颇为耗时且效率相对较低。实验的精确性要求贯穿于细胞样本的采集、量化及后续分析全过程。

尽管人工细胞计数方式直观且成本较低，但是出错难以避免。因此，深入理解细胞计数的核心原理——并识别及预防最常见的计数错误——对于优化实验室工作流程、实现时间资源的高效配置具有重要意义。

细胞计数中最常见的 10 大错误

1）仪器设备导致的错误

血细胞计数板相较于更先进的设备而言未集成新一代可视化技术。例如，康宁细胞计数仪（Corning 6749）等自动细胞计数设备，能够通过平板电脑或计算机迅速处理图像数据，以数字形式呈现分析结果，不仅提升了处理速度，而且在准确性上也超越了传统的可视化方法。

图 1：康宁细胞计数仪

2）手动计数导致的错误

手动细胞计数方法高度依赖于操作者的视觉识别，这一过程存在固有的不精确性。样本的不当可视化可能源自多种科学因素，诸如细胞聚集现象、细胞碎片的存在或是观察者的视力差异。这些因素均可导致细胞计数的显著偏差，进而无法真实且准确地反映细胞悬液中的细胞数量状况。

相比之下，自动细胞计数仪经过精心设计，旨在通过精确的光学系统与算法实现对细胞的自动化观测与检测，从而确保了计数的高度精确性与可靠性。

3）细胞浓度导致的错误

对细胞悬液进行计数时，若细胞浓度过低或过高，均易引发计数结果的偏差（尤其是应用传统血细胞计数板进行操作时）。具体而言，当细胞密度低于适宜范围，视野内观察到的细胞数量可能无法准确反映原始溶液中细胞的真实密度；反之，若细胞密度过高，则易导致细胞间相互重叠或聚集，进而造成异常的计数误差，影响结果的准确性。

4）体积估算导致的错误

当血细胞计数板的计数室内完全充盈液体时，其与盖玻片之间的微小间隙可能会发生细微扩张，进而引发体积估算上的误差。此外，在将细胞悬液转移至计数载玻片的过程中，类似的误差亦有可能产生。样本中存在的纤维状杂质或气泡等非细胞成分，亦会干扰细胞计数的准确性，导致计数错误。

5）计数用细胞悬液制备导致的错误

静置细胞悬液时，由于重力作用，悬液中的大量细胞会自然沉降至试管底部。因此，直接从该试管底部或未充分混匀的悬液中取样，将无法准确反映原悬液的细胞分布情况，进而可能导致细胞计数的结果出现偏差。为了确保细胞计数的准确性，在计数操作之前，充分重悬、吹打混匀计数样品是至关重要的步骤。此步骤能够有效提升细胞计数的精确度，确保所得数据能够真实反映悬液中的细胞浓度。

6）混淆细胞与细胞碎片导致的错误

即便是训练有素的观察者，在显微镜下镜检样品时，也可能会将某些细胞碎片误认为是细胞之一，这种情况可能导致假阳性现象的发生；同样地，人工细胞计数过程中，偶尔会出现将细胞错误归类为碎片的情况，从而引发假阴性错误。为了提升计数的准确性，自动细胞计数仪一般集成有特定的检测阈值和算法，用以降低假阳性及假阴性率。

7） 操作流程不规范导致的错误

鉴于人工细胞计数过程涉及人为操作，因此，针对样本中细胞计数的每一种方案均高度依赖于可能产生变异的个性化方法。若研究团队内部缺乏标准化的操作流程，这种变异性将显著增加误差风险。相比之下，自动细胞计数仪通过预设算法工作，能够识别并匹配样本的特定特征，并在统一的实验框架下执行计数任务。

8）记录及监测低效导致的错误

在科学研究或实验操作中，通过手动方式，操作人员需将细胞数量记录在实验室日志之中。随着科技的进步，细胞计数的效率与记录方式得到了显著提升。众多自动化细胞计数设备（例如康宁细胞计数仪）的显著优势在于，它们能够集成云技术，实现数据的即时记录与跨平台共享，从而增强了数据管理的便捷性与准确性。

9）数据运算导致的错误

在各类数据收集过程中，均不可避免地涉及复杂的数学运算。特别是在计算细胞悬液中细胞的平均数量时，数学方法的应用显得尤为关键。传统上，手动执行这些数学计算不仅耗时较长，而且容易引入人为误差。相比之下，现代自动细胞计数设备，诸如康宁细胞计数仪，能够迅速且准确地计算出样本中的细胞密度及存活率。

10）过于相信手动计数导致的错误

尽管人工细胞计数方法被证明在不同情境下具有一定的通用性和适应性，但其实际应用的效能往往受限于操作人员的技能水平及专注度。相比之下，采用自动化细胞计数器能够显著提升细胞计数的处理能力，实现更大规模的细胞计数任务，有效降低了人为错误的发生概率，并全面提升了工作效率和数据的准确性。

自动细胞计数仪之成本效益如何？

自动细胞计数仪在初期投资上展现出相对的经济性。尽管众多工厂初期倾向于采用人工计数方式，认为其成本效益较高，但深入分析后可见，人工计数所伴随的培训成本、遵循标准实验流程所耗费的时间，以及由此产生的计数误差，均导致了长期成本的显著增加，超出了通常的预期。

相比之下，一次性投资购置如康宁细胞计数仪（Corning 6749）这样的自动化细胞计数设备，能够确保实验室操作中的时间得到高效利用，减少或消除时间浪费，从而在长期内显著提升成本效益。

结语

自动化细胞计数设备，诸如康宁细胞计数仪（Corning 6749），凭借其高通量处理能力，能够实现快速且精准的细胞计数，从而有效释放研究人员的注意力，使其能够专注于科研工作的其他关键领域。